목차 일부
목차
제1장 단백질 연구전략
단백질 연구전략 = 16
제2장 단백질 정제법
1. 단백질 정제를 시작하기 전에 = 22
2. 정제의 진행방법 = 25
3. 단백질의 추출과 분획 = 27
4. 칼럼 크로마토그래피에 의한 정제 = 32
Ⅰ) 이온교환 크로마토그래피 = 32
Ⅱ) 겔 여과 크로마토그래피 = 37
Ⅲ) 소수성 크로마토그래피 = 4...
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목차
제1장 단백질 연구전략
단백질 연구전략 = 16
제2장 단백질 정제법
1. 단백질 정제를 시작하기 전에 = 22
2. 정제의 진행방법 = 25
3. 단백질의 추출과 분획 = 27
4. 칼럼 크로마토그래피에 의한 정제 = 32
Ⅰ) 이온교환 크로마토그래피 = 32
Ⅱ) 겔 여과 크로마토그래피 = 37
Ⅲ) 소수성 크로마토그래피 = 44
Ⅳ) 친화성 크로마토그래피 = 47
제3장 단백질의 분리와 동정
1. 서론 = 54
2. SDS 전기영동법 (SDS-PAGE)에 의한 단백질의 분리 = 56
3. 목적 단백질의 겔 내 Protease Digestion과 생성 Peptide의 회수 = 66
4. MALDI-TOF MS에 의한 Peptide 질량의 측정 및 데이터베이스 검색에 의한 목적 단백질의 동정 = 70
5. LC-MS/MS에 의한 Peptide 질량 측정 및 데이터베이스 검색에 의한 목적 단백질의 동정 = 75
제4장 항체 제작과 정제
1. 면역동물의 선택과 면역 = 86
2. Polyclonal 항체의 제작 = 88
3. Monoclonal 항체의 제작 = 92
4. Phage Display를 이용한 Monoclonal 항체의 제작 = 97
5. Peptide 항체의 제작과 응용 = 100
6. 항체의 제작 = 103
제5장 인산화 부위의 동정과 이용
1. 인산화 아미노산 분석 = 108
2. 인산화 부위의 동정 = 112
3. 인산화 peptide 항체의 제작과 응용 = 116
4. 항 인산화 TyrosineㆍSerineㆍThreonine 항체를 이용한 Immunoblotting = 120
5. 인산화 부위 변이체 (mimic)의 도입과 응용 = 124
제6장 발현 단백질의 제작과 이용
1. 대장균에 의한 단백질의 발현과 정제 = 128
2. Baculovirus에 의한 단백질의 발현과 정제 = 135
3. 융합 단백질의 발현과 정제 (FLAG-tag, myc-tag) = 143
4. Random insertion/deletion 변이법을 이용한 변이 단백질의 제작 = 147
제7장 단백질의 검출
1. Western blot 법 = 152
2. 항체에 의한 면역염색 = 158
3. In situ hybridization 법 = 162
4. Northern blot 법 = 167
5. 내재성 단백질의 세포내 국재의 관찰 (형광항체염색) = 172
제8장 동물세포에서의 단백질의 발현과 응용
1. 플라스미드를 이용한 일과성 발현 = 176
2. 안정형질발현주의 제작법 = 180
3. 레트로바이러스를 이용한 발현 = 184
4. 아데노바이러스를 이용한 발현 = 187
5. Microinjection = 192
6. 단백질의 도입 (protein transfection) = 196
7. 형광 단백질의 구축, 발현과 생세포에서의 해석 = 199
8. GFP-PLCδ 1-PH, GFP-Akt-PH에 의한 이노시톨 인지질의 국재 관찰 = 205
9. 직접 표식한 단백질의 도입과 관찰 = 209
10. FRET = 215
11. BRET = 219
12. FACS를 이용한 발현세포의 Sorting = 223
13. siRNA 도입에 의한 유전자 발현 저해 = 227
제9장 단백질 간 상호작용 분석과 단백질 성질의 해석
1. 면역침강법 = 234
2. 융합 단백질을 이용한 결합 단백질의 탐색 = 239
3. 효모 Two-Hybrid 법 = 243
4. 효모 Three-Hybrid 법 = 249
5. In vivo 단백질 간 상호작용 검출법 (β-lactamase를 이용한 Protein Fragment Complementation Assay : PCA) = 253
6. Protein Microarray 해석 = 257
7. BIACORE에 의한 단백질 상호작용의 해석 = 263
8. 단백질과 lipid와의 상호작용 해석 = 267
9. 단백질과 핵산의 상호작용의 해석 (Gel Shift법) = 271
10. Activity Gel 법 (In-gel protein kinase assay) = 275
Index = 277
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